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　　微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-5182 微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)，通過以下步驟實現(xiàn)POX定量檢測：

　　固相包被：微孔板預(yù)包被抗POX捕獲抗體，形成固相載體。

　　抗原結(jié)合：待測樣本中的POX與捕獲抗體特異性結(jié)合，形成抗體-抗原復(fù)合物。

　　酶標(biāo)顯色：加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，通過TMB底物顯色反應(yīng)，顏色深淺與POX濃度呈正相關(guān)。

　　二、試劑盒組成

　　組分規(guī)格保存條件

　　預(yù)包被微孔板96孔/板2-8℃(避光)

　　POX標(biāo)準(zhǔn)品6濃度梯度-20℃

　　HRP標(biāo)記檢測抗體1瓶4℃(避光)

　　TMB顯色底物1瓶4℃(避光)

　　終止液(2M H?SO?)1瓶室溫

　　三、操作步驟

　　樣本處理

　　微生物培養(yǎng)液：離心(10,000g，10min)取上清，避免反復(fù)凍融。

　　組織勻漿：按1:5比例加入PBS(pH 7.4)勻漿，離心后取上清。

　　檢測流程

　　加樣：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘.

　　洗滌：棄液后拍干，重復(fù)洗滌3次(每次300μL PBS-Tween) .

　　顯色：加入TMB底物100μL，避光反應(yīng)15分鐘，終止后測450nm吸光度.

　　四、注意事項

　　試劑保存：TMB底物需避光保存，避免凍融.

　　交叉污染：移液槍頭需一次性使用，不同樣本間更換槍頭.

　　數(shù)據(jù)有效性：標(biāo)準(zhǔn)曲線R2需≥0.98，樣本OD值需在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi).

　　五、技術(shù)參數(shù)

　　靈敏度：≤0.5 pg/mL(超靈敏型) .

　　檢測范圍：0.5-2000 pg/mL(線性范圍).

　　批內(nèi)/批間變異系數(shù)：<10%。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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