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本生簡述：血清使用中的常見問題解答
1， 血清存儲(chǔ)方法?
血清一般儲(chǔ)存于-20℃，同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后，若無法一次用完，建議分裝成小包裝，儲(chǔ)存于-20℃。
2， 如何解凍血清?
使用前融化，融化時(shí)最好先置于2-8℃冰箱中使之溶解，然后在室溫下使之全溶，溶解過程
中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。融化后的血清在4℃不宜長時(shí)間存放，應(yīng)盡快使用。
3，血清的使用濃度是多大?
使用濃度一般為5-20%，常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化，特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系，迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
4，血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管中，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
5.何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃，30分鐘水浴來處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活性，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對細(xì)胞生長只有微小的促進(jìn)，或沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)"，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱滅活這一步。如此以來，不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間，更確保您血清的質(zhì)量!
6.如何避免沉淀物的出現(xiàn)?
我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意正確的血清解凍步驟，并盡量避免滅活血清及長時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。
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